O diagnóstico da acromegalia é bastante sinxelo (pero só se pensas niso), xa que implica facer unha análise de sangue para determinar o nivel de GH e IGF-1. Na acromegalia hai un alto nivel de IGF-1 e GH, sabendo que a secreción de GH normalmente é intermitente, pero que na acromegalia é sempre alta porque xa non está regulada. O diagnóstico de laboratorio definitivo baséase na proba de glicosa. Dado que a glicosa normalmente diminúe a secreción de GH, a administración oral de glicosa permite detectar, mediante sucesivas análises de sangue, que, na acromegalia, a secreción de hormona de crecemento segue a ser elevada.

Unha vez confirmada a hipersecreción de GH, é necesario buscar a súa orixe. Hoxe, o patrón de ouro é unha resonancia magnética do cerebro que pode mostrar un tumor da glándula pituitaria. En casos moi raros, trátase dun tumor localizado noutro lugar (a maioría das veces no cerebro, pulmón ou páncreas) que segrega outra hormona que actúa sobre a glándula pituitaria, a GHRH, que estimula a produción de GH. Despois lévase a cabo unha avaliación máis extensa para atopar a orixe desta secreción anormal.