A técnica de ensaio de inmunoabsorción enzimática ligada - en inglés Enzyme-Linked Immuno Assay - ou proba ELISA é unha proba inmunolóxica que permite a detección ou ensaio de moléculas nunha mostra biolóxica. Foi conceptualizado e desenvolvido por dous científicos suecos, Peter Perlmann e Eva Engvall, na Universidade de Estocolmo en 1971.

As moléculas ensaiadas polo método ELISA son xeralmente proteínas. E os tipos de mostra inclúen materiais biolóxicos fluídos (plasma, soro, ouriña, transpirante), medios de cultivo celular ou unha proteína recombinante - proteína producida por unha célula cuxo material xenético foi alterado por recombinación xenética - purificada en solución.

A proba ELISA úsase principalmente en inmunoloxía para detectar e / ou medir a presenza de proteínas, anticorpos ou antíxenos nunha mostra. Esta proba serolóxica detecta en particular os anticorpos producidos polo corpo en resposta á contaminación vírica.

O uso de anticorpos para o diagnóstico de enfermidades infecciosas representa un método específico e rápido. A técnica ELISA é unha técnica inmunoencimática que permite visualizar, a partir dunha mostra biolóxica, as reaccións entre un antíxeno - un corpo considerado como estraño polo organismo vivo - e un anticorpo que usa unha reacción de cor producida por un marcador enzimático. xeralmente fosfatase alcalina e peroxidasa - previamente unidas ao anticorpo. A reacción de cor confirma a identificación da bacteria illada ou a presenza do virus desexado e a intensidade da cor dá unha indicación da cantidade de antíxenos ou anticorpos na mostra dada.

Existen catro tipos principais de probas ELISA:

• ELISA directo, permite detectar ou medir anticorpos. Só usa un anticorpo primario;
• ELISA indirecta, o máis utilizado, tamén permite detectar ou ensaiar anticorpos. Emprega un anticorpo secundario que lle dá mellor sensibilidade que o ELISA directo;
• ELISA en competición, permite a dosificación de antíxenos. Producido pola competencia por enlaces, non usa un encima;
• ELISA «en bocadillo», permite a dosificación de antíxenos. Esta técnica úsase normalmente na investigación.

A proba ELISA úsase para:

• Buscar e medir anticorpos en seroloxía para o diagnóstico de enfermidades infecciosas: viroloxía, parasitoloxía, bacterioloxía, etc .;
• Dose proteínas a baixas concentracións: dosificacións específicas de certas proteínas plasmáticas (inmunoglobulina E (IgE), ferritina, hormonas proteicas, etc.), marcadores tumorais, etc.;
• Dose pequenas moléculas: hormonas esteroides, hormonas tiroideas, drogas ...

A proba ELISA úsase en particular para diagnosticar moitas enfermidades infecciosas:

Enfermidades de transmisión sexual (ETS)

Incluíndo hepatite, sífilis, clamidia e VIH. Recomendado polas autoridades sanitarias, é a principal proba de detección da sida: mostra a presenza de anticorpos anti-VIH e do antíxeno p24 seis semanas despois da infección.

Enfermidades rexionais ou endémicas

Febre amarela, enfermidade do virus Marburg (MVM), Ladengue, enfermidade de Lyme, Chikungunya, febre do Rift Valley, ébola, febre de Lassa, etc.

O Covid-19

Para realizarse máis de 2 a 3 semanas despois do inicio dos síntomas, a proba ELISA permite identificar, en menos dunha hora, a presenza de anticorpos anti-SARS-CoV-2.

Patóxenos virais que causan infeccións prenatais

Toxoplasmosis, rubéola, citomegalovirus, herpes simple por exemplo.

Outros casos

Pero tamén atopou aplicacións na detección:

• Embarazos;
• Enfermidades autoinmunes;
• Alérxenos alimentarios: a determinación cuantitativa das inmunoglobulinas totais E (IgE) axuda na avaliación e tratamento das alerxias;
• Trastornos hormonais;
• Marcadores tumorais;
• Virus vexetais;
• E moitos máis

Como parte da detección de anticorpos anti-SARS-CoV-2, un estudo piloto realizado en agosto de 2020 polo Institut Pasteur, o CNRS, o Inserm e a Universidade de París confirma a fiabilidade da proba ELISA: ambas probas ELISA usan toda a proteína N de SARS-CoV-2 (ELISA N) ou o dominio extracelular da espiga do virus (S) como antíxenos diana. Esta técnica permitiría identificar anticorpos en máis do 90% dos casos, cunha taxa de falsos positivos moi baixa do 1%.

As probas Elisa, realizadas en laboratorios de análise con receita médica, custan uns 10 euros e son reembolsadas ao 100% polo seguro de saúde.

Levados a cabo en centros gratuítos de información, cribado e diagnóstico (CeGIDD), poden ser gratuítos para o VIH e o SARS-CoV-2.